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Prescript Ⅱ RT ProMix For qPCR (+gDNA cleAG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册r)

貨  號:
R418AR418B
規  格:
50rxn100rxn
價  格:
¥780¥1295
數  量:
-1+
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預混液形式的qRT-PCR首選試劑(去基因組)
AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册概述

      本AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册所使用的PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白結構, 具有與野生型相同的聚合酶活性, 可用于較長的cDNA合成以及全長cDNA文庫的構建等。AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册包含合成高質量cDNA所需的所有成分,適合于兩步法RT-qPCR檢測。4× gDNA cleAG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册r可徹底去除殘留的基因組DNA污染,保證后續定量結果更加可靠。10× RT Reaction Mix包含優化的緩沖體系、Oligo (dT)23VN、Random hexamers、dNTPs和gDNA cleAG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册r終止成分,保證cDNA的完整性。此外,AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册針對qPCR進行特別優化,比例優化的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix,可以在45 min內高效合成qPCR所用的模板cDNA。

AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册內容
 
組分 R418A R418B
4× gDNA cleAG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册r 200 μL 400 μL
10× RT Reaction Mix 100 μL 200 μL
Prescript Ⅱ Enzyme Mix 100 μL 200 μL
RNase-free ddH2O 1 mL 1 mL

 

AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册優勢

更高效的逆轉錄效率:PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白結構, 具有與野生型相同的聚合酶活性,提高了逆轉錄效率
完全預混型試劑:只要添加模板RNA和水,就可以簡便高效率地合成cDNA,且重復性良好
寬廣的模板使用范圍:反應體系中Total RNA的使用范圍寬廣,便于使用
強勁的基因組DNA清除能力:4× gDNA cleAG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册r可徹底去除殘留的基因組DNA污染,保證后續定量結果更加可靠

實驗案例

1.  gDNA Remover對基因組DNA去除效果的確認
 
 
      為了確認gDNA Remover對基因組DNA的去除效果,按以上表格條件進行了逆轉錄反應,接著用同一基因進行Realtime PCR檢測。結果顯示,用gDNA Remover處理后,即在③的條件時,沒有擴增出現,可以確認基因組DNA已被去除掉。

2.  與其他AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册同類型AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册基因組DNA去除能力的比較

 
 
      在HeLa total RNA中添加過量的人基因組DNA,與其他AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册同類型試劑盒進行基因組DNA去除能力的比較模擬實驗。結果顯示,本AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册去除基因組DNA效果更加明顯。

3.  優異的cDNA合成效率

 
 
      在10 μL反應體系中分別添加HeLa細胞來源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg,分別進行逆轉錄反應。然后,在Realtime PCR反應液(使用本AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册S018AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册)中分別添加上述的逆轉錄反應液各1% (V/V),用Realtime PCR對ACTB和B2M的cDNA量進行定量,然后進行cDNA合成量的比較。結果可見,在探討的范圍內,模板RNA的量和cDNA的得率密切相關,但無論模板RNA量的多寡,仍可維持很高的cDNA合成效率。可見在目的片段濃度有差異的樣品之間,逆轉錄反應效率的變化并不大,因此可將定量結果的誤差控制在最小范圍內。

4.  強大的逆轉錄能力

 
 
      以HeLa細胞Total RNA為模板,選擇高、中、低三種表達量的基因,在說明書提供的反應體系及反應條件下進行逆轉錄,然后用Realtime PCR檢測多對基因,結果表明,對不同表達量的基因,本AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册都具有優異的逆轉錄能力。

應用范圍

合成用于qPCR的cDNA模板,特別是較長的cDNA合成;全長cDNA文庫的構建。

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