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Prescript Ⅲ RT ProMix For qPCR

貨  號:
R420AR420B
規  格:
50rxn100rxn
價  格:
¥750¥1350
數  量:
-1+
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更高效的qRT-PCR專用預混液
AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册概述

      本AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册基于PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase,包含合成高質量cDNA所需的所有成分,適合于兩步法RT-qPCR檢測。通過定點突變得到的PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase是RNase H活性缺失的全新逆轉錄酶,酶的熱穩定性和cDNA合成效率得到大幅提升。2× RT Reaction Mix包含優化的緩沖體系、Oligo (dT)23VN、Random hexamers和dNTPs,PreScript Ⅲ Enzyme Mix包含PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase和RNase Inhibitor。此外,AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册針對qPCR進行特別優化,可以在15 min內短時高效地合成qPCR所用的模板cDNA。
 
AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册內容
 
組分 R420A R420B
2× RT Reaction Mix 500 μL 1 mL
PreScript Ⅲ Enzyme Mix 100 μL 200 μL
RNase-free ddH2O 1 mL 1 mL

 

AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册優勢

高度的熱穩定性:全新的逆轉錄酶PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase具有更好的熱穩定性
對復雜模板具有良好的延伸性能:在50℃條件下反轉錄反應也可以使具有復雜結構的RNA進行良好的延伸
模板兼容性高:兼容不同物種及完整度較差的Total RNA
短時高效的進行逆轉錄:優化比例的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix,可以在15 min內短時高效地合成qPCR所用的模板cDNA

實驗案例

1.  優異的cDNA合成效率
 
 
 
      在10 μL反應體系中分別添加HeLa細胞來源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg,分別進行逆轉錄反應。然后,在Realtime PCR反應液(使用本AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册S018AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册)中分別添加上述的逆轉錄反應液各1% (V/V),用Realtime PCR對ACTB和B2M的cDNA量進行定量,然后進行cDNA合成量的比較。結果可見,在探討的范圍內,模板RNA的量和cDNA的得率密切相關,但無論模板RNA量的多寡,仍可維持很高的cDNA合成效率。可見在目的片段濃度有差異的樣品之間,逆轉錄反應效率的變化并不大,因此可將定量結果的誤差控制在最小范圍內。

2.  與其他AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册逆轉錄性能的比較

 
 
      以梯度稀釋的HeLa細胞Total RNA為模板,在說明書提供的反應體系及反應條件下進行逆轉錄,然后用Realtime PCR 進行檢測。結果表明,與AAG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册同類AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册相比,PreScript Ⅲ Reverse TranscriptaseAG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册具有更高的逆轉錄性能。

3.  對不同模板的逆轉錄能力

 
 
      以HeLa細胞Total RNA為模板,挑選高、中、低三種表達量的基因,在說明書提供的反應體系及反應條件下進行逆轉錄,然后用Realtime PCR檢測多對基因,結果表明,對不同表達量的基因,本AG环亚真人平台_ag环亚真人手机app_ag环亚注册都具有優異的逆轉錄能力。
 
應用范圍

合成用于qPCR的cDNA模板,高質量 cDNA合成;全長cDNA文庫的構建等。

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